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Examen TIA (Microscopía) Feb 2009 – Biotecnología UFV

1.- Explica brevemente el origen del contraste en las imágenes de microscopía electrónica.

2.- a) Explica brevemente si son complementarias la criomicroscopía electrónica y la técnica de tinción negativa. b)¿Y la criomicroscopía electrónica tridimensional y la cristalografía de rayos X?

3.- Describe brevemente los siguientes patrones de difracción:

NOTA: Todos los patrones fueron obtenidos de micrografías tomadas a la misma magnificación con el mismo microscopio electrónico. Los Patrones A y B se tomaron el mismo día; el patrón C dos días después y el patrón D cuatro días después.

4.- a)¿Porqué es necesario corregir la Función de Transferencia del Contraste (CTF) del microscopio electrónico para conseguir reconstrucciones tridimensionales con una resolución subnanométrica?.
b) Indica la correspondencia entre las imágenes en espacio real de la primera fila (que corresponden a un ensamblado macromolecular con esa morfología) y las imágenes en espacio recíproco, es decir sus correspondientes transformadas de Fourier, de la segunda fila. Explica la conclusión de esa correspondencia.

5.- Se muestran las transformadas de Fourier (FFT) de dos imágenes de criomicroscopía electrónica tomadas a una magnificación nominal de 60.000X y en un microscopio electrónico operado a 200 kV. Teniendo en cuenta la FFT de un standard consistente en una regla con separaciones de 0.1 mm, mostrada a la derecha, describa los siguientes parámetros:
a) La frecuencia correspondiente al primer anillo de Thon para cada FFT (expresada en Å-1).
b) Máximas resoluciones que podrían proporcionar estas micrografías (expresada en Å).
c) Considerando además que estas FFT proceden de la misma muestra biológica, explica si serían suficientes para plantearse una reconstrucción tridimensional con una resolución subnanométrica. ¿Por qué es necesario tomar micrografías electrónicas de una muestra a distintos enfoques?

NOTAS:
1.- Se proporciona una regla a escala 1:1.
2.- Fórmulas necesarias:
R= (standard x X)/(Mag x Y)

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