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Examen TIA (Microscopía) Feb 2010 – Biotecnología UFV

1. El microscopio electrónico de transmisión. Explica brevemente a) coherencia del haz electrónico, y b) sistemas de vacío de la columna.

2. En una discusión entre dos científicos sobre una micrografía electrónica de ribosomas eucarióticos observados mediante tinción negativa, uno de ellos opina que la imagen está subenfocada, pero el otro cree que es astigmática. a) ¿Cómo establecerías quien tiene razón?; b) Si hubiera muchas imágenes similares, ¿Sería posible plantearse una reconstrucción tridimensional a resolución subnanométrica? ¿Cómo lo abordarías?

3. Explica el siguiente patrón de difracción obtenido a partir de una imagen de criomicroscopía electrónica.

4. Criomicroscopía electrónica y difracción de rayos X. Explica muy brevemente a) las aportaciones de cada una de ellas y lo que supone combinarlas, y b) “Flexible fitting” y sus implicaciones.

5. a) Explica y dibuja un esquema de cómo sería la transformada de Fourier de una imagen del bacteriófago T47 (hipotético), en la se puede observar simultáneamente el espaciamiento constante de las fibras de DNA densamente empaquetadas en el interior de la cabeza del fago (correspondiente a una frecuencia espacial de 26 Å), y el espaciamiento periódico de la cola con un aspecto de discos apilados como las separaciones de una regla (correspondiente a una frecuencia espacial de 40 Å). b) ¿Qué ventaja tendría usar como standard interno el espaciamiento de la cola de 40 Å en lugar de una regla con separaciones de 0.1 mm?

NOTA: la estructura periódica de la cola del fago 47 ha sido determinada mediante cristalografía de rayos X.

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